产品货号：
FZ036
中文名称：
黄曲霉毒素B1检测试剂盒(饲料专用)
英文名称：
Aflatoxin B1 ELISA Kit
产品规格：
96T/盒
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
检测原理：
技术指标：
产品组成：
保存：2～8℃，避免冷冻，有效期1年。
用户自备：
注意事项：
样本处理：
使用方法：
结果分析：
相关搜索：黄曲霉毒素B1检测试剂盒(饲料专用)，AFB1检测，黄曲霉毒素B1检测，Aflatoxin B1 ELISA Kit
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。
检测原理：
检测时，加入标准品或样本溶液，样本中的黄曲霉毒素B1和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗黄曲霉毒素B1抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含黄曲霉毒素B1含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中黄曲霉毒素B1的残留量。
技术指标：
| 灵敏度 | 0.3ppb(ng/mL) |
| 反应模式 | 25℃，30min～15min |
| 检测下限 | 谷物：3ppb 高油脂的饲料：3ppb 浓缩料、配合饲料：6ppb |
| 交叉反应率 | 黄曲霉毒素B1：100% |
| 样本回收率 | 谷物：90%±10% 高油脂饲料：85%±10% 浓缩料、配合饲料：85%±10% |
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 酶标板 | 96T |
| 标准液1(0ppb) | 1mL |
| 标准液2(0.3ppb) | 1mL |
| 标准液3(0.9ppb) | 1mL |
| 标准液4(2.7ppb) | 1mL |
| 标准液5(8.1ppb) | 1mL |
| 标准液6(24.3ppb) | 1mL |
| 酶标记物 | 5.5mL |
| 抗体工作液 | 5.5mL |
| 底物液A | 6mL |
| 底物液B | 6mL |
| 终止液 | 6mL |
| 20×浓缩洗涤液 | 40mL |
| 盖板膜 | 1张 |
| 自封袋 | 1个 |
保存：2～8℃，避免冷冻，有效期1年。
用户自备：
- 仪器：酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
- 微量移液器：单道20μL～200μL、100μL～1000μL、多道300μL
- 试剂：甲醇、正己烷、三氯甲烷或二氯甲烷
注意事项：
- 试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，必须平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的试剂组份应及时放回2～8℃密封保存。
- 试剂盒请在有效期内使用，拆开的试剂盒尽量在3个月内用完，以免拆开后保存不当失效。
- 试剂盒在使用过程中，不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
- 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象，所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
- 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
- 试剂盒中有些组分具有腐蚀性或毒性，避免接触皮肤。
- 本方法为筛选方法，如遇阳性样本请用确证方法进行确认。
- 试验过程遇到任何问题，请与厂商联系。
样本处理：
- 样本处理前须知：实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
- 配液：
- 样本提取液：70%甲醇，即V甲醇∶V去离子水＝7∶3
- 工作洗涤液：将20×浓缩洗涤液20倍稀释(1份20×浓缩洗涤液加19份去离子水)。
- 样本复溶液：35%甲醇，即V甲醇∶V去离子水＝3.5∶6.5。
- 样本提取液：70%甲醇，即V甲醇∶V去离子水＝7∶3
- 样本前处理步骤：
- 谷物样本：
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 取0.5mL上清，加入0.5mL去离子水，混匀；
- 取50μL进行分析。
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 高油脂饲料样本：
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加8mL正己烷和10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 去除上层液体，取0.5mL下层液体加入0.5mL去离子水，混匀；
- 取50μL进行分析。
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加8mL正己烷和10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 浓缩料、配合饲料样本：
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 取2mL上清，加入4mL三氯甲烷（或二氯甲烷），振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 去除上层液体，取下层液体2mL于50～60℃氮气或空气下吹干；
- 加入0.5mL样本提取液充分溶解干燥物，再加入0.5mL去离子水混匀；
- 取混匀液0.5mL，加入0.5mL样本复溶液，混匀；
- 取50μL进行分析。
- 称取2g±0.05g粉碎样本于50mL离心管中，加10mL样本提取液，振荡5min，室温4000r/min离心10min；
- 谷物样本：
使用方法：
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上，洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2～8℃。
- 编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
- 加样反应：加标准品或样本50μL/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μL/孔，再加入50μL/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。
- 洗涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350μL工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破。
- 显色：每孔加入底物液A 50μL，再加底物液B 50μL，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟。若蓝色过浅，可适当延长反应时间。
- 终止：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，终止反应。
- 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。
结果分析：
- 百分吸光率的计算
标准液或样本的百分吸光率等于标准液或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光度值(%)＝ A ×100% A0
A：标准溶液或样本溶液的平均吸光度值；A0：0ppb标准溶液的平均吸光度值 - 标准曲线的绘制与计算
以标准液百分吸光率为纵坐标，对应的标准液浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准液的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。
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